LB培养基的配置你必须要知道的知识

LB培养基的配置，你必须要知道的知识。

LB培养基的配置，你必须要知道的知识。

LB培养基是微生物学实验中常用的培养基，用于培养大肠杆菌等细菌。其分为液态或是加入琼脂制成的固态培养基。早LB培养基中加入抗生素还可用于大肠杆菌为宿主的克隆。LB一般被解释为Luria-Bertani培养基,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源於英语的lysogeny broth,即溶菌肉汤。LB培养基的配置：成分：胰蛋白胨(tryptone)10g；酵母提取物(yeast extract)5g；氯化钠(NaCl)10g；配制方法：（1）称量 分别称取所需量的胰化蛋白胨、酵母提取物和NaCl，置于烧杯中；（2）溶化 加入所需水量2/3的蒸馏水于烧杯中，用玻棒搅拌，使药品全部溶化；（3）调pH 用1mol/L NaOH溶液调pH至7.2；（4）定容 将溶液倒入量筒中，加水至所需体积；（5）加琼脂 加入所需量琼脂，加热融化，补足失水；（6）分装、加塞、包扎；（7）高压蒸汽灭菌100Pa灭菌20min；固体培养基另加 琼脂粉 15-20g；LB固体培养基1L和液体一样，加10g~15g琼脂粉，一定要在温度降下之前加好抗生素，并且倒好板。LB固体培养基倒板：1、配制：100mlLB培养基加入1~1.5g琼脂粉2、抗生素的加入：高压灭菌后，将融化的LB固体培养基置于55℃的水浴中，待培养基温度降到55℃时（手可触摸）加入抗生素，以免温度过高导致抗生素失效，并充分摇匀。3、倒板：一般15ml-20ml倒1个板子。培养基倒入培养皿后，打开盖子，在紫外下照10-15分钟。4、保存：用封口胶封边，并倒置放于4℃保存，一个月内使用。LB培养基优点：LB培养基由蛋白胨、酵母膏、nacl组成。首先,蛋白胨是经过胰酶处理过的蛋白，处理后,大分子的蛋白分子量变小，细菌更容易利用。此外，还含有嘌呤，提供生长因子。如要培养大肠杆菌，其实用普通蛋白胨代替胰蛋白胨是没有问题的。蛋白胨为细菌的生长提供氮源。其次培养基中的酵母膏酵母提取物主要成分是氨基酸、小肽、核甘酸、b族维生素、主要为细菌提供维生素和微量元素，是细菌生长所必须的.氯化钠在培养基中的作用是维持渗透压,兼能可提供无机盐。LB培养基与琼脂培养基之间的两大区别：区别一：琼脂培养基就是加了琼脂粉凝结成固体的LB培养基。固体的培养基用于细菌涂板，抗性筛选挑选单克隆之用 液体的用于单克隆菌种扩大培养，提取目的基因或者蛋白之用。区别之二：就是LB培养基是液体的，而营养琼脂培养基(蛋白胨培养基)是固体 具体的问题—— LB培养基的如下:?胰蛋白胨(Tryptone) 10g/L 酵母提取物(Yeast extract) 5g/L 氯化钠(NaCl) 5g/L。另外根据经验值用NaOH调节该培养基的pH,使其达到7.4，然后来培养E-coli。 营养琼脂培养基： 0.3g蛋白胨 1g 氯化钠 0.5g 琼脂 2g 自来水 100mL pH 7.0～7.2。