预染marker的标准技术分析

预染marker的标准技术分析

预染marker还可以在膜上标记蛋白分子量，所以吸引了许多实验室人员购买预染蛋白标准。值得注意的是预染蛋白Marker与染料共价耦联，所以在不同的缓冲条件下电泳时迁移特性可能会发生某些变化，可能导致一些偏差，所以不太适合精确定位蛋白——不过多数情况下Marker的条带未必能和我们的目标蛋白完全一样。 预染marker在电泳过程中或者转膜时可以直接观察到。预染蛋白分子量的出现方便了我们的实验，这种蛋白分子量标准可以帮助我们在电泳时、电泳后，以及转膜后监测电泳情况和估计迁移率——比如，已知垂直电泳最佳分辨区域大约在胶的2/3处，如果使用预染Marker就可以预测目标蛋白进入最佳分辨区时停止电泳以得到最佳分辨效果;如果观察到Marker电泳异常也可以及时终止电泳;另外在Western Blot转膜以后可以直接观察蛋白转膜是否完全，还可以在膜上标记蛋白分子量，所以吸引了许多实验室人员购买预染蛋白标准。 预染marker易于使用 – 与上样缓冲液预先混合，可直接凝胶上样，无需煮沸。条带清晰 – 亮度类似，但颜色不同的条带便于观察。质量检测 – 每批次均经过SDS-PAGE 和Western blotting 验证。两个参考条带 – 70kDa 为橙色，10kDa 为绿色。与膜兼容 – Western blotting 时彩色条带将转移到膜上应用，监测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳期间蛋白的迁移。监测Western blotting 蛋白转移到膜上的情况。测定SDS 聚丙烯酰胺凝胶和Western blots 上的蛋白分子量。