细胞培养标本的采集及保存

细胞培养标本的采集及保存

细胞培养标本的采集及保存：1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。操作步骤：1.使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。3.加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。4.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。5.每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。6.甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。7.每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。8.取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。9.在450nm波长处测定各孔的OD值。细胞培养HPEpiCL 人前列腺上皮细胞裂解物 200 µgHPrFL 人前列腺成纤维细胞裂解物 200 µgHPSMCL 人前列腺平滑肌细胞裂解物 200 µgHCOL 人颅骨造骨细胞裂解物 200 µgHSL 人滑膜细胞裂解物 200 µgHNPCL 人髓核细胞裂解物 200 µgHHSECL 人肝窦内皮细胞裂解物 200 µgHIBEpiCL 人肝内胆管上皮细胞裂解物 200 µgHHL 人肝脏细胞裂解物 200 µgHHSteCL 人肝脏星形细胞裂解物 200 µgHCMECL 人心脏微血管内皮细胞裂解物 200 µgHAECL 人主动脉内皮细胞裂解物 200 µgHASMCL 人主动脉平滑肌细胞裂解物 200 µgHCML 人心肌细胞裂解物 200 µgHCM-a L 人心肌细胞-裂解物 200 µgHCFL 人心脏成纤维细胞裂解物 200 µgHCF-av L 人心脏成纤维细胞-心室裂解物 200 µgHCF-aa L 人心脏成纤维细胞-心房裂解物 200 µgHCEpiCL 人角膜上皮细胞裂解物 200 µgHKL 人角膜细胞裂解物 200 µgHRPEpiCL 人视网膜色素上皮细胞裂解物 200 µgHLEpiCL 人晶状体上皮细胞裂解物 200 µgHIPEpiCL 人虹膜色素上皮细胞裂解物 200 µgHConFL 人结膜细胞裂解物 200 µgHNPCEpiCL 人无色素睫状上皮细胞裂解物 200 µgHTMCL 人小梁网细胞裂解物 200 µgHAmEpiCL 人羊膜上皮细胞裂解物 200 µgHVTL 人滋养层绒毛细胞裂解物 200 µgHVMFL 人绒毛间叶成纤维细胞裂解物 200 µgHPA-v L 人前脂肪细胞-内脏裂解物 200 µgHPA-s L 人前脂肪细胞-皮下裂解物 200 µgHMSC-bm L 人间充质干细胞-骨髓裂解物 200 µgHMSC-ad L 人间充质干细胞-脂肪裂解物 200 µgHMSC-hp L 人间充质干细胞-肝脏裂解物 200 µgHUMSCL 人脐带间充质干细胞裂解物 200 µg细胞培养