美国兰博柱后衍生-高效液相色谱法测定植物油中的AFB1

美国兰博柱后衍生-高效液相色谱法测定植物油中的AFB1

美国兰博柱后衍生-高效液相色谱法测定植物油中的AFB1的含量

AFB1是AF霉菌的代谢产物，广泛存在于霉变的粮食及由粮食制得的食品和饮料中。AFB有许多种，其中B1的致癌性最强，而且化学结构非常稳定，加热到268 ～ 269℃才分解，普通的食物处理方法不会减少B1的含量，所以AFB1一旦进入人类的食物链，会对人类身体健康造成极大的危害。1993 年，AFB1被世界卫生组织( WHO) 的癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物质，也是目前食用植物油食品中安全性检查主要项目之一。

目前AFB1检测所用的薄层法测定AFB1的方法不是专一性的，因有的样品中其他物质亦可产生类似AFB1的蓝紫色荧光点，对测定产生干扰，也因此造成样品处理繁琐( 要进行样品提取、净化) ，分析所需时间长，而且只能测定最低限量，不能精确测定样品中AFB1的含量。如干扰物的Ｒf 值与AFB1一致，很易造成测定误差，所以这种测定方法只作化学分析法的一般佐证法。

酶标法虽然在使用上比较快速，但与薄层法一样，均属于一种半定量的分析方法，重复性差，试剂寿命短，需低温保存，假阳性概率较高，需要配置专门的酶标仪，在基层检测难度较大，对样品要求高，对某些含盐量高、脂肪含量高的样品需要进行额外的适当的处理，该方法通常可以作为初筛，对阳性结果需进行进一步的确正检测。

柱前衍生高效液相色谱法因其方法上的局限性其衍生的信号强弱会因手动操作的强弱和时间等条件的改变而改变，这样给定量带来诸多的误差。上述这些方法都在样品处理上较复杂，灵敏度差，回收率不理想。

天津兰博应用实验室采用柱后衍生高效液相色谱法，得到了很好的结果。

Lanbo Series6500高效液相色谱仪 PCR3柱后衍生系统

仪器:

美国兰博液相色谱仪，配荧光检测器；

美国兰博柱后衍生仪PCR3；涡旋混合振荡器；超声波清洗器；电子天平。

柱后衍生高效液相色谱法

色谱条件：

色谱柱: Zorbax SB C18( 250 mm ×4.6 mm，5 μm) ;

流动相: 甲醇-水( 45 ∶ 55) ; 流速: 0.8 ml/min;

柱温: 35 ℃;

检测器: 荧光检测器。激发波长( λex) :360 nm，发射波长( λem) : 420 nm;

进样量: 20 μl;

柱后衍生化系统:

衍生溶液: 0.05% 碘溶液;

衍生溶液流速: 0.2 m l/min;

柱后衍生反应器温度: 70℃，反应时间: 1 min。

利用柱后衍生系统和高效液相色谱相结合，对食用油中的AFB1进行检测，通过对色谱条件和样品处理方法的摸索，得到灵敏度、回收率、精密度较理想的测试方法，且检测所需时间短，分辨率高，还可对样品同时进行定性、定量测定，利于大量批次样品检测，有条件的实验可作为常规手段推广应用。