劲马揭开-ELISA背景深及全部呈有色原因是什么-

劲马揭开:ELISA背景深及全部呈有色原因是什么?

七月初，清华大学的杨老师在我司购买了3个elisa试剂盒，前段时间，杨老师反馈ELISA背景深，全部呈有色，问是什么原因？希望能得到技术员的解答。我司技术员有着多年的ELISA酶联免疫法的操作经验，有着丰富的实验经历，为杨老师解答了心中的疑问，深受杨老师的赞扬！就杨老师的问题，我司技术员做了以下分析：

ELISA实验中，背景深，全部呈有色（通常的Elisa背景值OD<0.2）

根据技术员的分析，可能存在的原因有以下几条：1、ELISA实验可能原因之一：实验过程中洗涤不充分，洗后未拍干，样品中其它成分残留或酶标记物残留； 解决办法：洗液准确配制；充分洗涤，静置15秒，彻底拍干。加样或加酶拍板的滤纸应弃去不用，不要反复使用，否则易造成污染。

2、ELISA实验可能原因之二：底物污染，未避光保存，出现颜色；解决办法：弃去底物，重新配置

3、ELISA实验可能原因之三：样品稀释液污染； 解决办法：弃去稀释液，重新配置

4、ELISA实验可能原因之四：吸头重复使用，未洗净或消毒不彻底； 解决办法：吸头尽可能一次性使用

5、ELISA实验可能原因之五：不正确的孵育时间，温度（尤其是底物孵育的时间）； 解决办法：最为常用的温育温度有37℃和室温，其次是43℃和2～8℃。完全按照说明书要求

6、ELISA实验可能原因之六：偶联抗体（streptavidin-HRP）浓度过高； 解决办法：按照说明书调整到最佳的浓度

7、ELISA实验可能原因之七：板子不正确的贮存； 解决办法：酶标板贮存于2-8 ℃；使用结合力低点的Elisa板

8、ELISA实验可能原因之八：没有正确封闭； 解决办法：在标准品稀释液中加入动物蛋白或延长封闭时间

9、ELISA实验可能原因之九：样本溶血严重； 解决办法：建议使用非溶血或轻微溶血样本，严重溶血样本会导致背景偏高。

一般情况下，ELISA实验中，背景深，全部呈有色的原因都一一列出来了！技术员的表现让杨老师很满意！这次试验完成后，准备下次再订购2盒。

上海劲马生物科技有限公司是一家专业供应各类ELISA试剂盒，标准品，细胞及相关生物试剂的生物公司，公司产品丰富，种类齐全，价格实惠，售后完善！欢迎广大科研学者前来选购！