解读血清融化三步法背后的秘密原理

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解读：血清融化三步法背后的秘密原理！

提起细胞培养中，牛血清的融化，大家首先想到的就是4℃过夜法。

今天小威把国际上流行多年的『血清融化三步法』介绍给大家，让你知道怎样让你的血清，通过合适的融化，事半功倍！

与4℃过夜法相比

三步法为什么对血清更好呢？

重点有二！

其一：关系到沉淀出现的几率！

记得吗？血清在融化过程中，瓶子里冰块的底部你会看见亮亮的蛋白丝在下沉，如同蜂蜜溶于水时的亮线，这就是血清中大量的蛋白在快速融化，而水的熔点高于蛋白，融化的速度是比蛋白慢的。（回想一下高级冰淇淋和大棒冰的区别，你懂得！）

试想，如果采用4℃过夜的方法，1瓶500毫升的血清融化好，大约需要10小时左右，蛋白先融化，沉降在瓶子的底部，水融化的速度比蛋白慢，于是造成大量蛋白溶于少量的水，此时就很容易有一些蛋白饱和析出，（大多是脂蛋白和纤连蛋白），这就是血清融化中产生沉淀的重要原因之一。

采用三步法，只要2.5个小时，温和有效地加快了水融化的速度，另一方面，融化过程中可以间断轻轻摇摆瓶子，让蛋白在瓶中混匀。

此方法不但节约了时间，而且最大限度减少了血清沉淀出现的几率。

其二：血清在培养细胞中，最重要的是利用它的活性的因子，因此，融化过程中最大限度地保留因子的活性，就变得非常重要。

回忆一下，细胞复苏时，要保持细胞的活性，我们是要遵循“快融”原则还是“慢融”原则呢？

快融！

血清同样如此！

三步法需要两个半小时，

4℃过夜需要大约10个小时（冰箱一般设2-8℃，所以各实验室融化时间会稍有出入）。

哪个速度对保留活性更好？不言而喻！

三步法详细解读

下面，我们详细解读『血清的三步融化法』的步骤：

图：刚从-28℃拿出的血清，是这个样子的

融化血清第一步

温度：室温

时间：100ml - 35分钟

500ml - 90分钟

1000ml - 100分钟

或

温度：15-20℃水浴（新接的自来水24℃上下）

时间：100ml - 5分钟

500ml - 18分钟

1000ml - 20分钟

图：这是最近Ausbian血清的大区经理周博，在天津血研所实验室拍到的——实验人员三步法化血清的图片，为了节约时间，实验人员采取的是第一步20℃水浴18min的方法。（用现接的自来水放入冰冻的血清，即可达到20℃水浴的效果。一般实验室没有能制冷到20℃的水浴锅）

融化血清第二步

温度：20℃水浴（新接的自来水24℃上下）

时间：100ml - 15分钟

500ml - 25分钟

1000ml - 30分钟

图：第二步，仍旧是新接的自来水浴，25min

融化血清第三步

温度：37℃水浴

时间：100ml - 20分钟

500ml - 35分钟

1000ml - 45分钟

图：大家看，使用三步法融化的血清十分清亮，养细胞的效果也是棒棒哒。

注意

1.在水浴过程中，血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动，使血清混匀，但不要产生泡沫!

2.胎牛血清不推荐热灭活。

3.此三步法适用于所有品牌、所有级别的进口或国产血清，均可让血清在减少沉淀、保留活性、提高细胞培养效果方面，得到不同程度的提高！

看到这里，你是不是迫不及待的想试试融化血清的三步法了呢？

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关于我们

上海威正翔禹生物科技创办于2003年。

持续为国家重大科研项目提供高品质细胞培养用进口血清、培养基。

为实验室提供支原体预防和祛除的完整解决方案，

为生产、科研提供国际一线无动物源性微生物培养基、蛋白胨、蛋白水解物产品。

十四年来，被生物界誉为值得“持续信赖的供货商”。

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